非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
SCF 抗体 (G-3): sc-13126. MG-63 (A), NCI-H1299 (B), NIH/3T3 (C), Neuro-2A (D), C6 (E) 和 PC-12 (F) 全细胞裂解液中 SCF 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
SCF双切口酶质粒(m): sc-421644-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SCF 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- SCF双切酶质粒（m）和SCF双切酶质粒（m2）编码针对Kitl的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：SCF: sc-13126，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SCF双切口酶质粒(m) | sc-421644-NIC | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Kitl 基因编码干细胞因子（SCF）。SCF 是一种既可为膜结合形式、也可为可溶性形式的细胞因子，通过与 KIT 受体酪氨酸激酶结合并传递信号，调控造血祖细胞、黑色素细胞、生殖细胞和肥大细胞的存活、增殖与迁移。SCF–KIT 的结合可激活 PI3K–AKT、RAS–MAPK 及 JAK/STAT 等信号通路，从而影响干细胞/祖细胞的维持、与微环境（niche）的相互作用以及谱系分化承诺。在体内与细胞模型中，Kitl/SCF 活性异常与造血、色素沉着、生育能力及肥大细胞生物学方面的缺陷相关；同时，鉴于 KIT 通路失调可促成肿瘤性与炎症性表型，SCF 也常在相关研究背景下被重点探讨。
SCF 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Kitl 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Kitl内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Kitl的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Kitl基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。