Sar1a CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422799

개요

Sar1a는 소형 GTPase인 SAR1A를 암호화하며, SAR1A는 소포체(ER) 출구 부위에서 COPII 코팅 소포 형성을 개시하는 데 필수적인 인자로 ER-골지체 수송을 구동합니다. SAR1A는 GDP 결합 상태와 GTP 결합 상태를 오가며 막의 곡률 형성을 촉진하고 SEC23/SEC24 및 SEC13/SEC31 복합체를 모집하여 분비 경로의 흐름과 단백질 항상성(proteostasis)을 유지합니다. Sar1a 의존적 수송은 지질 및 지단백 처리, 세포외기질 분비, 세포 표면 수용체 전달에 영향을 미치며, 이를 통해 다양한 신호전달 및 분화 프로그램의 광범위한 조절과 연결됩니다. COPII 매개 수송과 ER 항상성의 교란은 발달 및 대사 표현형과 관련된 스트레스 반응과 병리 과정에 연관되어 있어, Sar1a는 분비 의존적 생물학을 기전적으로 연구하는 데 유용한 핵심 노드입니다.

Sar1a CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Sar1a 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Sar1a 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Sar1a의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Sar1a 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Sar1a 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Sar1a 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Sar1a 기능에 중요한 Sar1a 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Sar1a 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Sar1a CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Sar1a CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Sar1a 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Sar1a HDR 플라스미드 (m) 및 Sar1a HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Sar1a 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Sar1a 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.