SAPS1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406315

Übersicht

PPP6R1 kodiert SAPS1, eine regulatorische Untereinheit der Proteinphosphatase 6 (PP6), die dazu beiträgt, die katalytische Aktivität auf bestimmte Substrate und subzelluläre Kompartimente zu lenken. Über den Zusammenbau des PP6-Komplexes trägt SAPS1 zu Serin/Threonin-Dephosphorylierungsprogrammen bei, die den Zellzyklusverlauf, die Organisation der mitotischen Spindel und die Signalübertragung der DNA-Schadensantwort beeinflussen. Die PP6-gekoppelte Phosphoregulation überschneidet sich mit stressaktivierten Signalwegen und der Checkpoint-Kontrolle und prägt so Genomstabilität und Proliferationsfähigkeit. Fehlregulierte PP6-Regulatoruntereinheiten wurden mit einer gestörten Phosphorylierungs-Homöostase in verschiedenen Krankheitskontexten in Verbindung gebracht, einschließlich einer krebsassoziierten Umverdrahtung von Signalwegen.

Das SAPS1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des PPP6R1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des PPP6R1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von PPP6R1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SAPS1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von PPP6R1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SAPS1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf PPP6R1-Exone abzielen, die für die SAPS1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere PPP6R1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SAPS1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SAPS1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des PPP6R1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SAPS1 HDR-Plasmid (h) und SAPS1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von PPP6R1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten PPP6R1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.