Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
SAPK4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400423
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SAPK4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SAPK4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SAPK4 Anticorpo (E-7): sc-46678
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SAPK4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400423 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MAPK13 codifica a proteína quinase 4 ativada por estresse (SAPK4), uma quinase de serina/treonina da família p38 MAPK que converte sinais inflamatórios e de estresse ambiental em respostas transcricionais e pós-transcricionais. A SAPK4 contribui para a regulação da sinalização associada a citocinas, de programas de diferenciação celular e do controle, dependente do contexto, da apoptose e da proliferação por meio da fosforilação de efetores a jusante. Como parte da rede mais ampla de MAPKs, MAPK13/SAPK4 interage com vias que moldam as respostas imunes inatas e a biologia epitelial. A desregulação da sinalização de p38 MAPK, incluindo a atividade de MAPK13, tem sido associada à fisiopatologia inflamatória e a processos relacionados ao câncer, tornando-a um nó útil para estudos mecanísticos da sinalização de estresse.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SAPK4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MAPK13 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MAPK13, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MAPK13 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SAPK4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MAPK13 para a investigação da sinalização de SAPK4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MAPK13 críticos para a função SAPK4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MAPK13 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SAPK4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SAPK4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MAPK13. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SAPK4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SAPK4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MAPK13 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MAPK13 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.