Particules Lentivirales d'Activation (h) S-100A5: sc-418401-LAC

Le gène humain **S100A5** code la protéine **S-100A5**, une protéine à mains EF liant le Ca2+ de la famille S100, qui agit comme capteur de calcium pour moduler les interactions protéine–protéine et une signalisation dépendante de l’état cellulaire. S-100A5 est associée à des processus régulés par le calcium, notamment l’organisation du cytosquelette, la dynamique membranaire et les réponses transcriptionnelles, en accord avec l’implication plus large des protéines S100 dans la biologie neuronale et épithéliale. Des modifications des profils d’expression de la famille S100 ont été associées à des voies de signalisation liées à l’inflammation et à des voies pertinentes en cancérologie telles que MAPK et NF-κB, faisant de S100A5 un marqueur utile et un nœud mécanistique pour l’étude des réponses cellulaires au stress et des programmes de différenciation. Son expression dépendante du contexte soutient des applications visant à explorer la spécification de lignée, l’intégration des signaux et le remodelage des voies dans des modèles pertinents de maladie.

Les particules d'activation lentivirales S-100A5 (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de S100A5 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales S-100A5 (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription S100A5, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de S-100A5. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif S100A5 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.