RTEL1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-403196

Übersicht

RTEL1 kodiert die „Regulator of Telomere Elongation Helicase 1“, eine DNA-Helikase, die die Genomstabilität erhält, indem sie eine fehlerfreie DNA-Replikation und -Reparatur fördert. RTEL1 baut abnorme DNA-Sekundärstrukturen wie G-Quadruplexe ab und löst telomerische T-Loops auf, unterstützt damit die Telomererhaltung und verhindert unangemessene Rekombination. Es wirkt in Signal- und Reparaturwegen, die mit dem Fortschreiten der Replikationsgabel, der Kontrolle der homologen Rekombination und der Signalübertragung der DNA-Schadensantwort verknüpft sind. Eine Störung der RTEL1-Aktivität ist mit Telomerdysfunktion und Phänotypen genomischer Instabilität assoziiert, die an erblichen Telomerbiologie-Erkrankungen und einer erhöhten Krebsanfälligkeit beteiligt sind.

Das RTEL1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des RTEL1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des RTEL1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von RTEL1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die RTEL1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von RTEL1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der RTEL1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf RTEL1-Exone abzielen, die für die RTEL1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere RTEL1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom RTEL1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom RTEL1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des RTEL1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das RTEL1 HDR-Plasmid (h) und RTEL1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von RTEL1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten RTEL1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.