Plasmide Double Nickase (h) Romo1: sc-417144-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Romo1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Romo1 Double Nickase (h) et le plasmide Romo1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ROMO1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Romo1 | sc-417144-NIC | 20 µg | $410.00 |
ROMO1 code le modulateur 1 des espèces réactives de l’oxygène (Romo1), une petite protéine de la membrane mitochondriale qui régule la production basale et induite par le stress de ROS et contribue à coordonner l’homéostasie rédox. En influençant la dynamique mitochondriale, l’efficacité de la phosphorylation oxydative et la signalisation sensible à l’état rédox, Romo1 peut moduler des voies liées à la progression du cycle cellulaire, à l’apoptose et aux réponses inflammatoires. Une expression ou une activité dérégulée de ROMO1 a été associée à des phénotypes de stress oxydatif et a été rapportée dans de multiples contextes pathologiques où la dysfonction mitochondriale et une signalisation ROS altérée contribuent à la physiopathologie, notamment en oncologie ainsi que dans la recherche cardiométabolique et sur les maladies neurodégénératives.
Romo1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ROMO1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ROMO1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ROMO1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ROMO1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.