Plásmido Doble Nickase (h) RNF182: sc-415138-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)RNF182 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RNF182 (h) y el plásmido de doble nickasa RNF182 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RNF182. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) RNF182 | sc-415138-NIC | 20 µg | $410.00 |
RNF182 codifica una ligasa E3 de ubiquitina con dominio RING que cataliza la transferencia de ubiquitina a sustratos proteicos específicos, controlando así la estabilidad de las proteínas y la amplitud de la señalización en el sistema ubiquitina–proteasoma. Mediante la regulación dependiente de ubiquitinación de efectores intracelulares, RNF182 se vincula con vías que gobiernan las respuestas al estrés celular, el control de calidad proteica y el recambio de proteínas asociadas a membrana y de señalización. Se han descrito alteraciones en la expresión de RNF182 en estudios de biología del sistema nervioso y neuroinflamación, en consonancia con funciones en la homeostasis neuronal y una proteostasis regulada. Estas características hacen de RNF182 una diana útil para investigar cómo las ligasas de ubiquitina moldean las redes de señalización y las transiciones de estado celular en modelos celulares humanos.
RNF182 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RNF182 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RNF182. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RNF182. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RNF182 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.