Plásmido Doble Nickase (h) RNase L: sc-403412-NIC

El gen humano **RNASEL** codifica **RNasa L**, una endorribonucleasa inducible por interferón que se activa mediante **oligoadenilato 2′-5′**, producido por las enzimas **OAS** durante el reconocimiento inmunitario innato de ARN bicatenario viral y celular. Una vez activada, la RNasa L escinde ARN monocatenario para restringir la replicación de patógenos, remodelar el transcriptoma celular y amplificar la señalización antiviral a través de vías como **RIG-I/MDA5–MAVS** y las respuestas posteriores de **interferón de tipo I**. La actividad de la RNasa L también influye en la estabilidad del ARN, el control de la traducción y las respuestas al estrés, vinculándola con una regulación más amplia del crecimiento celular y la apoptosis. La variación genética o la desregulación de **RNASEL** se han asociado con alteraciones de la defensa antiviral y fenotipos relacionados con la inflamación, lo que respalda su relevancia en estudios de señalización inmunitaria y mecanismos de susceptibilidad a enfermedades.

RNase L El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RNASEL en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RNASEL. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RNASEL. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RNASEL alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.