Plasmide Double Nickase (h) Rlf: sc-410980-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Rlf correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Rlf Double Nickase (h) et le plasmide Rlf Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RLF. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Rlf | sc-410980-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Rlf | sc-410980-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RLF (Rearranged L-myc fusion) code Rlf, une grande protéine nucléaire impliquée dans la régulation transcriptionnelle et des processus associés à la chromatine via des interactions avec des cofacteurs régulateurs. Rlf a été associée au contrôle de programmes d’expression génique influençant le maintien de l’état cellulaire, la prolifération et la différenciation, ce qui concorde avec des rôles dans l’organisation nucléaire et la régulation épigénétique. Une expression altérée de RLF ou une perturbation de son locus a été rapportée dans le cadre de réarrangements génomiques observés dans des cancers, ce qui souligne son intérêt pour l’étude des mécanismes de dérégulation transcriptionnelle oncogénique. En tant que gène humain au potentiel régulateur large, RLF est fréquemment étudié afin de relier le contrôle génique dépendant de la chromatine à des phénotypes associés aux maladies dans des modèles cellulaires.
Rlf Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RLF dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RLF. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RLF. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RLF.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.