RIPA Lysis Buffer System

Das RIPA (Radio-Immunoprecipitation Assay) Lysis Buffer System wird in der Biochemie und Molekularbiologie häufig für die Lyse und Solubilisierung von Zellen und Geweben verwendet. Der Puffer wurde entwickelt, um Zellmembranen effizient zu zerstören und gleichzeitig zelluläre Proteine zu solubilisieren, was ihn zu einer idealen Wahl für die Proteinextraktion für nachfolgende Analysen wie Western Blotting und Immunpräzipitation macht. RIPA-Puffer enthält eine Mischung aus drei Detergenzien - Natriumdeoxycholat, NP-40 und SDS. Diese Kombination ist besonders wirksam bei der Solubilisierung eines breiten Spektrums von Proteinklassen, so dass sie sich für umfassende Untersuchungen der zellulären Proteinzusammensetzung eignet. Natriumdeoxycholat und NP-40 sind nicht-ionische bzw. ionische Detergenzien, die einen Großteil der Lipid-Lipid- und Lipid-Protein-Wechselwirkungen unterbrechen, während SDS eine starke anionische Umgebung schafft, die Proteine denaturiert und ihre Löslichkeit gewährleistet. Die Wirksamkeit des RIPA-Puffers wird durch das Vorhandensein von Puffersubstanzen und Zusatzstoffen wie Tris, das einen konstanten pH-Wert aufrechterhält, und Natriumchlorid, das für eine Ionenstärke sorgt, die zur Stabilisierung der Proteine beitragen kann, weiter verbessert. Optionale Komponenten wie EDTA können hinzugefügt werden, um zweiwertige Kationen zu chelatisieren und den Abbau der Zielproteine durch Proteasen zu verhindern. In der wissenschaftlichen Forschung wird der RIPA-Puffer wegen seiner Robustheit und Vielseitigkeit bei der Extraktion von Proteinen unter Bedingungen geschätzt, die die meisten posttranslationalen Modifikationen und Protein-Protein-Wechselwirkungen erhalten. Dies macht ihn zu einem wichtigen Werkzeug in der Proteomik und anderen zellbiologischen Studien, bei denen ein detailliertes Verständnis der Proteininteraktionen und -funktionen unerlässlich ist.

Alexa Fluor^® ist ein Markenzeichen von Molecular Probes Inc., OR., USA

LI-COR^® und Odyssey^® sind Markenzeichen von LI-COR Biosciences