Rim3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407285

Übersicht

RIMS3 kodiert das Rab3-interagierende Molekül 3 (Rim3), ein präsynaptisches Gerüstprotein, das an der Organisation des Neurotransmitterfreisetzungsapparats in aktiven Zonen beteiligt ist. Durch Wechselwirkungen mit Rab3-GTPasen und anderen synaptischen Komponenten trägt Rim3 zum Andocken und Priming von Vesikeln, zur calciumgetriggerten Exozytose und zur Aufrechterhaltung der synaptischen Effizienz bei. RIMS3-assoziierte Mechanismen greifen in neuronale Signalwege ein, die synaptische Übertragung und Plastizität steuern – Prozesse, die häufig mit neuroentwicklungsbedingten und neuropsychiatrischen Phänotypen in Verbindung gebracht werden. Eine veränderte Expression oder Variation in RIMS3 wurde im Kontext von Funktionsstörungen des Nervensystems untersucht, was das Gen für die Erforschung molekularer Determinanten der Synapsenorganisation und Netzwerkaktivität relevant macht.

Das Rim3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des RIMS3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des RIMS3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von RIMS3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Rim3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von RIMS3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Rim3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf RIMS3-Exone abzielen, die für die Rim3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere RIMS3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Rim3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Rim3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des RIMS3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Rim3 HDR-Plasmid (h) und Rim3 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von RIMS3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten RIMS3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.