Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Ribosomal Protein S3 (h): sc-402327
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Ribosomal Protein S3 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Ribosomal Protein S3, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Ribosomal Protein S3 Antibody (C-7): sc-376008
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Ribosomal Protein S3 (h) | sc-402327 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
RPS3 code la protéine ribosomique S3, un composant central de la petite sous-unité ribosomique 40S qui soutient l’initiation de la traduction, le décodage et, plus globalement, la biogenèse des ribosomes. Au-delà de son rôle structurel dans la synthèse protéique, RPS3 a été associée aux réponses au stress cellulaire et peut influencer des réseaux de signalisation liés à la régulation transcriptionnelle, à l’apoptose et aux réponses aux dommages de l’ADN. Comme la fonction ribosomique contraint la prolifération et l’homéostasie du protéome, une expression altérée de RPS3 ou un déséquilibre ribosomal est fréquemment étudié dans des contextes de croissance oncogénique, de signalisation inflammatoire et de stress neurodégénératif. La perturbation de RPS3 est donc utile pour analyser comment le contrôle translationnel s’articule avec les voies de maintenance du génome et de protéostasie.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Ribosomal Protein S3 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène RPS3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du RPS3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert RPS3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Ribosomal Protein S3.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en RPS3 pour l'étude de la signalisation de Ribosomal Protein S3, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de RPS3 essentiels à la fonction de Ribosomal Protein S3
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de RPS3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Ribosomal Protein S3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Ribosomal Protein S3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus RPS3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Ribosomal Protein S3 plasmide HDR (h) et le Ribosomal Protein S3 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie RPS3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles RPS3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.