Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Rho T2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406496
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Rho T2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Rho T2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Rho T2 Anticuerpo (E-9): sc-518198
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Rho T2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406496 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
RHOT2 codifica Rho T2 (también conocida como Miro2), una GTPasa atípica de la familia Rho anclada en la membrana externa mitocondrial que ayuda a coordinar el tráfico, el posicionamiento y el control de calidad de las mitocondrias. A través de interacciones con proteínas adaptadoras que conectan las mitocondrias con motores de microtúbulos, RHOT2 contribuye al transporte dependiente del citoesqueleto y favorece la distribución mitocondrial necesaria en regiones celulares con alta demanda energética. Rho T2 también está implicada en la regulación sensible al calcio de la dinámica y el recambio mitocondrial, convergiendo con vías que gobiernan la homeostasis mitocondrial y las respuestas al estrés. La disfunción de RHOT2 se ha estudiado en el contexto de alteraciones de la dinámica mitocondrial y la bioenergética, procesos que con frecuencia se asocian con la neurodegeneración y la reprogramación metabólica relacionada con el cáncer.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Rho T2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RHOT2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RHOT2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RHOT2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Rho T2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RHOT2 para la investigación de la señalización de Rho T2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de RHOT2 críticos para la función de Rho T2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RHOT2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Rho T2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Rho T2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RHOT2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Rho T2 (h) y el plásmido HDR Rho T2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RHOT2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RHOT2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.