RHAMM CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-402431

Übersicht

Das humane Gen **HMMR** kodiert **RHAMM** (Rezeptor für hyaluronanvermittelte Motilität), ein hyaluronanbindendes Protein, das an der Zelloberfläche und im Zytoplasma wirkt, um Motilität, Polarität und die Organisation der mitotischen Spindel zu koordinieren. RHAMM integriert Signale aus der extrazellulären Matrix mit dem Umbau des Zytoskeletts und greift in Signalnetzwerke wie **MAPK/ERK** ein, die Proliferation und Migration beeinflussen. Seine regulierte Lokalisation an Mikrotubuli und centrosomenassoziierten Strukturen verknüpft RHAMM mit Zellzyklusprogression, Spindelaufbau und genomischer Stabilität. Eine dysregulierte HMMR/RHAMM-Expression und veränderte Hyaluronan-Signalgebung wurden mit onkogenen Phänotypen, einschließlich erhöhter Invasion und Metastasierung, in Verbindung gebracht und unterstützen seine Nutzung als mechanistisches Ziel in der Krebs- und Zellmigrationsforschung.

Das RHAMM CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des HMMR-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des HMMR-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von HMMR nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die RHAMM-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von HMMR-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der RHAMM-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf HMMR-Exone abzielen, die für die RHAMM-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere HMMR-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom RHAMM CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom RHAMM CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des HMMR-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das RHAMM HDR-Plasmid (h) und RHAMM HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von HMMR-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten HMMR-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.