Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RGS7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423946
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- RGS7 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico RGS7, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
RGS7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423946 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Rgs7 codifica el regulador de la señalización de proteínas G 7 (RGS7), una GAP que acelera la hidrólisis de GTP mediada por Gαi/o para finalizar la señalización de los GPCR. RGS7 desempeña funciones destacadas en el sistema nervioso mediante complejos con Gβ5 y R7BP, modulando la regulación impulsada por receptores de la señalización de la adenilil ciclasa/cAMP, la actividad de canales iónicos y la transmisión sináptica. Al limitar la amplitud y la duración de las respuestas a neurotransmisores, RGS7 influye en la excitabilidad neuronal, la plasticidad y las salidas de señalización a nivel de circuitos. La desregulación de vías vinculadas a RGS7 se ha asociado con fenotipos neuroconductuales y neuropsiquiátricos en estudios genéticos y funcionales, lo que respalda su relevancia para la investigación mecanística en neurociencia.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO RGS7 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Rgs7 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Rgs7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Rgs7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RGS7.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Rgs7 para la investigación de la señalización de RGS7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Rgs7 críticos para la función de RGS7
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Rgs7 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido RGS7 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido RGS7 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Rgs7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RGS7 (m) y el plásmido HDR RGS7 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Rgs7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Rgs7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.