RGS7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406720

概要

RGS7（Gタンパク質シグナル制御因子7）はGTPase活性化タンパク質であり、GαサブユニットのGTP加水分解を促進することで、GPCRシグナル伝達の終結を加速します。とくにGi/o共役経路において顕著です。RGS7は神経細胞のシグナル伝達複合体で重要な役割を担い、しばしばGβ5やR7BPなどの膜アンカーと会合して、シナプス伝達、cAMP動態、イオンチャネル調節を形成します。GPCRエフェクター経路を制御することで、RGS7は神経系における神経伝達物質応答や活動依存的なシグナル伝達プログラムに影響を与えます。RGS7関連シグナルの制御異常は、GPCRトーンやシナプス恒常性の変化が関与すると考えられる神経精神疾患および神経変性疾患の機序との関連で研究されています。

RGS7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるRGS7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、RGS7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、RGS7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、RGS7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、RGS7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、RGS7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• RGS7の機能に不可欠なRGS7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、RGS7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• RGS7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびRGS7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、RGS7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  RGS7 HDRプラスミド（h）および RGS7 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRGS7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRGS7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。