RGS7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406720

Übersicht

RGS7 (Regulator of G-Protein-Signalgebung 7) ist ein GTPase-aktivierendes Protein, das die Beendigung der GPCR-Signalübertragung beschleunigt, indem es die GTP-Hydrolyse der Gα‑Untereinheit fördert, insbesondere in Gi/o‑gekoppelten Signalwegen. Es spielt eine wichtige Rolle in neuronalen Signalkomplexen, häufig in Verbindung mit Gβ5 und Membranankern wie R7BP, und prägt so synaptische Transmission, cAMP-Dynamik und die Modulation von Ionenkanälen. Über seine Kontrolle von GPCR-Effektor-Signalwegen beeinflusst RGS7 Neurotransmitterantworten und aktivitätsabhängige Signalprogramme im Nervensystem. Eine Fehlregulation der RGS7-assoziierten Signalgebung wurde im Zusammenhang mit Mechanismen neuropsychiatrischer und neurodegenerativer Erkrankungen untersucht, bei denen ein veränderter GPCR-Grundtonus und eine gestörte synaptische Homöostase eine Rolle spielen.

Das RGS7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des RGS7-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des RGS7-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von RGS7 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die RGS7-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von RGS7-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der RGS7-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf RGS7-Exone abzielen, die für die RGS7-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere RGS7-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom RGS7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom RGS7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des RGS7-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das RGS7 HDR-Plasmid (h) und RGS7 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von RGS7-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten RGS7-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.