Plasmide CRISPR/Cas9 KO RENBP (m): sc-422648

Présentation

Renbp code la protéine de liaison à la rénine (RENBP), une protéine associée à la membrane impliquée dans la régulation de composants du système rénine–angiotensine et de voies apparentées de maturation protéolytique. Dans les tissus murins, l’expression de RENBP a été associée à la modulation de la disponibilité de la rénine et de la signalisation en aval, influençant le tonus vasculaire, l’homéostasie des électrolytes et les réponses inflammatoires. Par ces connexions, Renbp est pertinent pour des études mécanistiques sur la régulation de la pression artérielle et les voies de stress cardiométabolique. Une signalisation rénine–angiotensine altérée est également associée à des pathologies rénales et cardiovasculaires, faisant de Renbp un nœud utile pour explorer des réseaux de gènes qui couplent la régulation des protéases à la physiologie systémique.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO RENBP (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Renbp dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Renbp, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Renbp à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine RENBP.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Renbp pour l'étude de la signalisation de RENBP, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de Renbp essentiels à la fonction de RENBP
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Renbp pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le RENBP plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le RENBP plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Renbp. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le RENBP plasmide HDR (m) et le RENBP (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Renbp pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Renbp définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.