RELA/NFκB p65 Lentiviral Activation Particles (m): sc-422642-LAC

Maus *Rela* kodiert den Transkriptionsfaktor RELA/NF-κB p65, eine zentrale Komponente des kanonischen NF-κB-Signalwegs, der mit NFKB1 (p50) einen Heterodimer bildet und nach Aktivierung durch IKK-vermittelten Abbau von IκB rasch in den Zellkern transloziert. RELA integriert Signale von TNF, IL‑1, TLRs, Antigenrezeptoren und zellulärem Stress, um Gene zu regulieren, die Entzündung, angeborene und adaptive Immunantworten, Zellüberleben und Differenzierung steuern. Durch Crosstalk mit MAPK-, JAK/STAT- und IRF-Signalwegen koordiniert RELA Zytokin- und Chemokinprogramme, Adhäsion sowie Feedback-Regulatoren der Immunhomöostase. Eine fehlregulierte RELA-Aktivität wird häufig als molekularer Readout für inflammatorische Pathobiologie verwendet und ist relevant für Modelle von Autoimmunität, Infektion und entzündungsassoziierten onkogenen Prozessen.

RELA/NFκB p65 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Rela-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

RELA/NFκB p65 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Rela-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen RELA/NFκB p65-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Rela-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.