Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RELA/NFκB p65 Double Nickase Plasmid (m): sc-422642-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das RELA/NFκB p65 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- RELA/NFκB p65 Double-Nickase-Plasmid (m) und RELA/NFκB p65 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Rela abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: RELA/NFκB p65: sc-8008
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
RELA/NFκB p65 Double Nickase Plasmid (m) | sc-422642-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RELA/NFκB p65 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-422642-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Maus-Rela kodiert die RELA/NF-κB‑p65‑Untereinheit, einen zentralen transkriptionellen Regulator des kanonischen NF-κB-Signalwegs, der mit NF-κB1 (p50) zusammenwirkt, um stimulusabhängige Genexpression zu steuern. RELA integriert Signale aus TNF‑Rezeptor-, IL‑1/TLR-, Antigenrezeptor- und DNA-Schadenswegen, um entzündliche Zytokine, Chemokine, Adhäsionsmoleküle, Zellüberlebensprogramme und Effektorgene der angeborenen Immunantwort zu koordinieren. Seine Aktivität wird streng durch die Sequestrierung via IκB und durch IKK‑vermittelte Phosphorylierung reguliert, was zur nukleären Translokation und Chromatinbindung führt. Eine fehlregulierte RELA-Signalgebung wird breit mit chronischer Entzündung, Autoimmunität, Infektionsantworten und onkogenen Prozessen in Verbindung gebracht – unter anderem durch veränderte Apoptoseresistenz und die Umgestaltung des entzündlichen Mikromilieus.
RELA/NFκB p65 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Rela-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Rela abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Rela-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Rela-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.