RBMX CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-417339

Übersicht

Humanes RBMX (RNA-binding motif protein X-linked) ist ein nukleäres RNA-bindendes Protein, das mit naszierenden Transkripten assoziiert und zum Prä‑mRNA‑Spleißen, zur mRNA‑Reifung sowie zur Koordination von Transkription und RNA‑Prozessierung beiträgt. RBMX wird mit der Aufrechterhaltung des Genoms in Verbindung gebracht, unter anderem durch Funktionen in der DNA‑Schadensantwort und in replikationsassoziierten Prozessen, wodurch die chromosomale Integrität während der Zellzyklusprogression erhalten bleibt. Über seine Beteiligung an spleißosomenbezogenen Signalwegen und die Regulation des Isoformausstoßes von Transkripten kann RBMX Genexpressionsprogramme beeinflussen, die Proliferation und Stressantworten steuern. Eine Fehlregulation der RBMX‑Expression oder ‑Funktion wurde in krebs- und entwicklungsbezogenen Kontexten beschrieben, in denen veränderte RNA‑Prozessierung und Genomstabilität häufige pathogenetische Merkmale sind.

Das RBMX CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des RBMX-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des RBMX-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von RBMX nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die RBMX-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von RBMX-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der RBMX-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf RBMX-Exone abzielen, die für die RBMX-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere RBMX-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom RBMX CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom RBMX CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des RBMX-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das RBMX HDR-Plasmid (h) und RBMX HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von RBMX-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten RBMX-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.