RBM45 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406889

Panoramica

RBM45 (RNA binding motif protein 45) è una proteina legante l’RNA conservata, coinvolta nella regolazione genica post-trascrizionale attraverso interazioni con il pre-mRNA e con complessi di processamento dell’RNA. È stata associata al controllo dello splicing dell’RNA, della stabilità dei trascritti e dell’assemblaggio di ribonucleoproteine in risposta allo stress, processi che modellano i programmi di espressione genica neuronali e gliali. RBM45 è spesso studiata nel contesto della neurodegenerazione e della dismetabolia dell’RNA, inclusa la sua associazione con l’aggregazione proteica patogena e con alterazioni della dinamica dei granuli di RNA. La perturbazione della funzione di RBM45 può quindi essere utilizzata per indagare le vie che collegano il processamento dell’RNA, le risposte cellulari allo stress e la proteostasi.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO RBM45 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene RBM45 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del RBM45 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto RBM45 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina RBM45.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di RBM45 per lo studio della segnalazione di RBM45, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni RBM45 critici per la funzione di RBM45
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di RBM45 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal RBM45 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal RBM45 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus RBM45. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal RBM45 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR RBM45 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia RBM45 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio RBM45 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.