RBM15 Lentiviral Activation Particles (h): sc-417289-LAC

RBM15 (RNA-Bindungsmotiv-Protein 15) ist ein nukleärer RNA-bindender Faktor, der die posttranskriptionelle Genexpression durch die Kontrolle des Prä‑mRNA-Spleißens, der Transkriptstabilität und des RNA-Exports reguliert. Es wurde mit epitranskriptomischer Regulation in Verbindung gebracht, unter anderem durch die Assoziation mit m6A-Writer-Komplexen, und beeinflusst hämatopoetische Differenzierungsprogramme, indem es die linienspezifische RNA-Prozessierung moduliert. RBM15 trägt zu Netzwerken der Transkription und RNA-Reifung bei, die Zellschicksalsentscheidungen prägen, und ist wiederholt im Zusammenhang mit dysregulierter Hämatopoese relevant. Veränderte RBM15-Funktion und RBM15-assoziierte Fusionen wurden im Kontext leukämogener Signalwege und umfassenderer Defekte im RNA-Stoffwechsel untersucht.

RBM15 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente RBM15-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

RBM15 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der RBM15-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen RBM15-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen RBM15-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.