Plasmide Double Nickase (h) RBM10: sc-418527-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RBM10 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RBM10 Double Nickase (h) et le plasmide RBM10 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RBM10. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: RBM10 Antibody (H-4): sc-515548
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) RBM10 | sc-418527-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) RBM10 | sc-418527-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RBM10 (RNA binding motif protein 10) est un facteur de liaison à l’ARN principalement nucléaire qui régule l’épissage des pré-ARNm, la sélection alternative des exons et le traitement de l’ARN via des interactions avec des composants du spliceosome et des motifs d’ARN spécifiques de séquence. En modulant la production d’isoformes de transcrits, RBM10 influence des programmes d’expression génique liés au contrôle du cycle cellulaire, à l’apoptose et à la différenciation, et a été impliqué dans des réseaux pertinents pour la signalisation, notamment des décisions d’épissage associées à la voie Notch. Une activité ou une expression dérégulée de RBM10 est associée à des profils d’épissage altérés observés dans plusieurs contextes cancéreux, où les changements d’isoformes peuvent affecter la prolifération et les voies de réponse au stress. Ces propriétés font de RBM10 une cible utile pour des études mécanistiques de la régulation de l’épissage et du remodelage du transcriptome dans les cellules humaines.
RBM10 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RBM10 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RBM10. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RBM10. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RBM10.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.