Ran BP-3 Plasmide Double Nickase (h): sc-405001-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Ran BP-3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Ran BP-3 Double Nickase Plasmid (h) e il Ran BP-3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RANBP3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Ran BP-3 Antibody (D-2): sc-377253
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Ran BP-3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405001-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ran BP-3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405001-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RANBP3 codifica la proteina 3 legante Ran (Ran BP-3), un cofattore dell’esportazione nucleare che partecipa al trasporto nucleo‑citoplasmatico dipendente da RanGTP. Ran BP-3 interagisce con i recettori di esportazione per supportare l’esportazione mediata da CRM1/XPO1 e contribuisce a mantenere una corretta distribuzione nucleo‑citoplasmatica di proteine regolatorie e RNA. Attraverso il suo ruolo nelle dinamiche di trasporto, RANBP3 si collega a vie che controllano programmi trascrizionali, progressione del ciclo cellulare e risposte allo stress. La disregolazione del macchinario di esportazione nucleare, inclusi i fattori che modulano Ran e la funzione delle exportine, è implicata in alterazioni della segnalazione e in fenotipi di instabilità genomica rilevanti per il cancro e altri contesti proliferativi o neurodegenerativi.
Ran BP-3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RANBP3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RANBP3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RANBP3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RANBP3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.