Ral BP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402752

Visão geral

RALBP1 codifica a Ral BP-1 (também conhecida como RLIP76), um efetor multifuncional de RalA/RalB que conecta a sinalização de pequenas GTPases à endocitose, à remodelação do citoesqueleto e ao tráfego de membranas. A Ral BP-1 interage com componentes da internalização dependente de clatrina e com complexos adaptadores para influenciar a renovação de receptores e a dinâmica de vesículas, ao mesmo tempo que contribui para redes de resposta ao estresse por meio do transporte dependente de ATP de conjugados de glutationa e de metabólitos xenobióticos. Por meio dessas atividades, RALBP1 afeta processos como migração celular, progressão do ciclo celular e resistência celular ao estresse oxidativo e eletrofílico. A expressão ou a sinalização desregulada de RALBP1 foi relatada em múltiplos contextos de câncer e é frequentemente estudada em relação à invasão, a vias associadas à metástase e à tolerância ao estresse celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Ral BP-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RALBP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RALBP1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RALBP1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Ral BP-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RALBP1 para a investigação da sinalização de Ral BP-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RALBP1 críticos para a função Ral BP-1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RALBP1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Ral BP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Ral BP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RALBP1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Ral BP-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Ral BP-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RALBP1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RALBP1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.