RAI15 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405878

개요

SMYD5는 SET 및 MYND 도메인을 포함하는 라이신 메틸트랜스퍼레이스를 암호화하며, 크로마틴 조절과 전사 제어에 관여해 세포 정체성과 스트레스 반응을 형성하는 맥락 의존적 프로그램을 뒷받침합니다. 히스톤 및 단백질 메틸화의 조절을 통해 SMYD5는 복제와 연동된 크로마틴 조립과 유전자 발현 역학을 포함한 DNA 주형 기반 과정에 영향을 미치는 후성유전 경로와 연관됩니다. SMYD5 활성의 이상 조절은 여러 모델 시스템에서 염증 신호전달의 변화 및 종양성 전사 상태와 연관된 것으로 보고되어, 종양 진행과 면역 관련 표현형의 기전을 규명하는 데 중요한 표적이 됩니다. 인간 세포에서 SMYD5 의존성 네트워크를 분석하면, 후성유전 조절 인자가 신호 입력을 통합해 증식과 분화를 조절하는 방식이 어떻게 이루어지는지 명확히 할 수 있습니다.

RAI15 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SMYD5 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SMYD5 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SMYD5의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 RAI15 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 RAI15 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SMYD5 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• RAI15 기능에 중요한 SMYD5 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SMYD5 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• RAI15 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 RAI15 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SMYD5 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  RAI15 HDR 플라스미드 (h) 및 RAI15 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SMYD5 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SMYD5 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.