Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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Rad54 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401750
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rad54 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Rad54, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rad54 Anticorpo (F-11): sc-374598
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rad54 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401750 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RAD54L codifica a ATPase humana Rad54 dependente de DNA, um remodelador de cromatina da família SWI2/SNF2 que coopera com RAD51 para promover a recombinação homóloga. A Rad54 estabiliza e remodela os filamentos pré-sinápticos de RAD51, estimula a invasão de fita e dá suporte ao reparo de quebras de dupla fita no DNA durante o estresse replicativo, contribuindo para a integridade do genoma e para a competência dos checkpoints do ciclo celular. A proteína atua nas redes de recombinação homóloga e de resposta a danos no DNA, interagindo com fatores-chave de reparo para regular o processamento de intermediários de recombinação. A atividade alterada de RAD54L é relevante para fenótipos de instabilidade cromossômica frequentemente investigados na biologia do câncer e em modelos de reparo de DNA defeituoso.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Rad54 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RAD54L em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RAD54L, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RAD54L na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Rad54.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RAD54L para a investigação da sinalização de Rad54, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RAD54L críticos para a função Rad54
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RAD54L para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Rad54 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Rad54 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RAD54L. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Rad54 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Rad54 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RAD54L para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RAD54L definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.