Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Rad21 Plasmide Double Nickase (h): sc-402348-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Rad21 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Rad21 Double Nickase Plasmid (h) e il Rad21 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RAD21. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Rad21 Antibody (B-2): sc-271601
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Rad21 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402348-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rad21 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402348-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RAD21 codifica Rad21, un componente fondamentale del complesso coesina che forma una struttura ad anello per tenere insieme i cromatidi fratelli e organizzare l’architettura della cromatina. Rad21 supporta la corretta segregazione dei cromosomi, la dinamica della replicazione del DNA e la riparazione delle rotture a doppio filamento del DNA tramite vie che coordinano la progressione del ciclo cellulare e il mantenimento del genoma. Modellando interazioni cromatiniche a lunga distanza, RAD21 contribuisce anche alla regolazione della trascrizione ai confini definiti da coesina/CTCF. La deregolazione o le mutazioni dei componenti della coesina, incluso RAD21, sono associate alle coesinopatie e sono state implicate in fenotipi di instabilità genomica rilevanti per la biologia del cancro.
Rad21 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RAD21 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RAD21. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RAD21. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RAD21 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.