Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Rab 9A Plasmide Double Nickase (h): sc-416915-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Rab 9A Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Rab 9A Double Nickase Plasmid (h) e il Rab 9A Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RAB9A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Rab 9A Antibody (Mab9): sc-53145
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Rab 9A Plasmide Double Nickase (h) | sc-416915-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rab 9A Plasmide Double Nickase (h2) | sc-416915-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RAB9A codifica la piccola GTPasi Rab9A, un regolatore chiave del traffico dei endosomi tardivi che supporta lo smistamento del carico e il trasporto tra endosomi e rete trans-Golgi. Alternando ciclicamente gli stati legati a GDP e a GTP, Rab9A coordina eventi di gemmazione vescicolare, motilità e ancoraggio, importanti per il riciclo dei recettori, le vie correlate ai lisosomi e l’omeostasi delle membrane. Un’attività alterata di Rab9A è stata associata a una disregolazione del trasporto endolisosomiale e di processi adiacenti all’autofagia, frequentemente implicati nella biologia delle malattie neurodegenerative e infettive e nel rimodellamento del traffico intracellulare associato al cancro. Queste funzioni rendono RAB9A un bersaglio utile per studi meccanicistici sul trasporto vescicolare, la comunicazione tra organelli e la proteostasi.
Rab 9A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RAB9A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RAB9A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RAB9A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RAB9A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.