Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Rab 33B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404070
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Rab 33B El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Rab 33B, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Rab 33B Anticuerpo (RR-3): sc-81920
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Rab 33B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404070 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
RAB33B codifica la pequeña GTPasa Rab33B, miembro de la familia Rab que coordina los eventos de tráfico de membranas en la interfaz Golgi–retículo endoplásmico (RE). Rab33B regula la formación de vesículas, la clasificación de la carga y la homeostasis del Golgi, y se ha implicado en etapas de transporte vinculadas a la autofagia que influyen en la dinámica de los orgánulos. A través de estas funciones, contribuye a la organización de la vía secretora y a la fidelidad del transporte intracelular, procesos que con frecuencia se ven alterados en fenotipos del neurodesarrollo y neurodegenerativos. La función alterada de RAB33B se ha asociado a trastornos esqueléticos y del desarrollo de tipo sindrómico, lo que respalda su relevancia para estudiar la homeostasis celular dependiente del tráfico.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Rab 33B (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RAB33B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RAB33B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RAB33B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Rab 33B.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RAB33B para la investigación de la señalización de Rab 33B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de RAB33B críticos para la función de Rab 33B
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RAB33B para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Rab 33B CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Rab 33B CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RAB33B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Rab 33B (h) y el plásmido HDR Rab 33B (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RAB33B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RAB33B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.