Rab 26 Lentiviral Activation Particles (h): sc-411810-LAC

RAB26 kodiert Rab26, ein Mitglied der Rab-Familie kleiner GTPasen, das den intrazellulären Membrantransport reguliert, indem es zwischen GDP- und GTP-gebundenen Zuständen wechselt und das Abschnüren, die Bewegung und die Fusion von Vesikeln koordiniert. Rab26 wurde mit der Organisation des Endolysosomen- und sekretorischen Systems in Verbindung gebracht, einschließlich Transport­schritten, die mit autophagiebezogenen Prozessen und regulierter Exozytose in spezialisierten Zelltypen verknüpft sind. Durch die Beeinflussung von Fracht-Sortierung und Kompartimentidentität kann RAB26 die Proteostase sowie signalabhängige Outputs modulieren, die von der Vesikeldynamik abhängen. Eine fehlregulierte Rab-GTPase-abhängige Trafficking-Maschinerie ist in der Neurobiologie und in Stressantwort-Signalwegen breit relevant, was mechanistische Studien zur Funktion von RAB26 in der zellulären Homöostase motiviert.

Rab 26 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente RAB26-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Rab 26 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der RAB26-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Rab 26-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen RAB26-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.