Pygopus 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405936
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Pygopus 1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Pygopus 1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Pygopus 1 Anticorpo (3E1): sc-517079
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Pygopus 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405936 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PYGO1 codifica a Pygopus 1, um coativador nuclear que conecta complexos transcricionais β-catenina/TCF à cromatina na sinalização canônica de Wnt. Por meio de interações com BCL9/9L e com a maquinaria de modificação de histonas, a Pygopus 1 sustenta programas transcricionais que controlam a especificação do destino celular, a proliferação e a homeostase epitelial. Os outputs de Wnt dependentes de PYGO1 se cruzam com processos como a manutenção de características de células-tronco e a diferenciação, e a regulação alterada dessa via é frequentemente implicada em estados transcricionais oncogênicos e em desregulação do desenvolvimento. Essas características tornam o PYGO1 um alvo útil para dissecar a expressão gênica dirigida por Wnt e o engajamento com a cromatina em modelos celulares humanos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Pygopus 1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PYGO1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PYGO1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PYGO1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Pygopus 1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PYGO1 para a investigação da sinalização de Pygopus 1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PYGO1 críticos para a função Pygopus 1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PYGO1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Pygopus 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Pygopus 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PYGO1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Pygopus 1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Pygopus 1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PYGO1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PYGO1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.