Plásmido Doble Nickase (h) PSS2: sc-404133-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)PSS2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PSS2 (h) y el plásmido de doble nickasa PSS2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PTDSS2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) PSS2 | sc-404133-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) PSS2 | sc-404133-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PTDSS2 codifica la fosfatidilserina sintasa 2 (PSS2), una enzima de membrana del retículo endoplásmico que cataliza la producción de fosfatidilserina mediante un intercambio de bases utilizando fosfatidiletanolamina. Esta actividad respalda la remodelación de glicerofosfolípidos, la biogénesis de membranas y la homeostasis de los orgánulos, e influye en procesos posteriores como la señalización apoptótica, en la que la externalización de la fosfatidilserina actúa como una señal celular clave. La composición lipídica dependiente de PTDSS2 puede modular el tráfico vesicular, las respuestas al estrés del retículo endoplásmico y la transducción de señales mediada por lípidos. Las alteraciones del metabolismo de la fosfatidilserina y del equilibrio lipídico del retículo endoplásmico se han vinculado con la desregulación de vías de crecimiento y supervivencia en múltiples contextos patológicos, incluido el reajuste metabólico asociado al cáncer.
PSS2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PTDSS2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PTDSS2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PTDSS2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PTDSS2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.