Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PRX VI Double Nickase Plasmid (h): sc-401549-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das PRX VI Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- PRX VI Double-Nickase-Plasmid (h) und PRX VI Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf PRDX6 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: PRX VI: sc-166454
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
PRX VI Double Nickase Plasmid (h) | sc-401549-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PRX VI Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401549-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRDX6 kodiert Peroxiredoxin 6 (PRX VI), ein bifunktionales antioxidatives Enzym mit Glutathionperoxidase- und Phospholipase-A2-Aktivität, das zur Aufrechterhaltung des zellulären Redoxgleichgewichts und der Homöostase von Membranphospholipiden beiträgt. Indem PRX VI die Anreicherung von Wasserstoffperoxid und Lipidhydroperoxiden begrenzt, moduliert es oxidativen Stress, Entzündungsreaktionen und Signalwege des Zellüberlebens, einschließlich Prozessen, die mit mitochondrialer Funktion und dem Lipidstoffwechsel verknüpft sind. Eine veränderte PRDX6-Expression oder -Aktivität wurde mit einer gestörten Handhabung reaktiver Sauerstoffspezies und Lipidperoxidation in Verbindung gebracht – Merkmale, die häufig bei entzündlichen Erkrankungen, Neurodegeneration und in der Krebsbiologie beobachtet werden. Als Knotenpunkt der Redox- und Lipidreparatur wird PRX VI häufig in Modellen oxidativer Schädigung, der Ferroptose-Anfälligkeit und stressadaptiver Signalgebung untersucht.
PRX VI Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des PRDX6-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von PRDX6 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die PRDX6-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit PRDX6-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.