PRRG1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-436837

Übersicht

Das Mausgen *Prrg1* kodiert PRRG1, ein prolinreiches Transmembranprotein mit einer γ-Carboxyglutamat-(Gla)-Domäne, die auf Funktionen bei calciumabhängigen Proteininteraktionen an der Zelloberfläche hindeutet. PRRG1 wird mit adhäsionsassoziierter Signalübertragung und membrannahen Regulationsprozessen in Verbindung gebracht, die die Organisation des Zytoskeletts, den Rezeptortransport (Trafficking) und die Kommunikation zwischen extrazellulärer Matrix und intrazellulären Signalwegen beeinflussen können. Expressionsmuster und berichtete Assoziationen verknüpfen PRRG1 mit Programmen der zellulären Differenzierung und gewebespezifischer Homöostase, was es für Studien zu Signalstörungen in entwicklungs- und krankheitsbezogenen Kontexten relevant macht. Die Aufklärung der PRRG1-Funktion kann helfen zu verstehen, wie Gla-Domänen-Proteine lokale Signal-Mikroumgebungen und nachgeschaltete transkriptionelle Antworten modulieren.

Das PRRG1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Prrg1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Prrg1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Prrg1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die PRRG1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Prrg1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der PRRG1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Prrg1-Exone abzielen, die für die PRRG1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Prrg1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom PRRG1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom PRRG1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Prrg1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das PRRG1 HDR-Plasmid (m) und PRRG1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Prrg1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Prrg1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.