Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Progesterone Receptor CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-422214
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Progesterone Receptor Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im Progesterone Receptor-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Progesterone Receptor: sc-398898
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Progesterone Receptor CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) | sc-422214 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Pgr kodiert den Maus-Progesteronrezeptor, einen ligandenaktivierten nukleären Hormonrezeptor, der als Transkriptionsfaktor wirkt und die nachgeschalteten, durch Progesteron gesteuerten Genprogramme kontrolliert. Nach Hormonbindung bildet PGR Dimere, transloziert in den Zellkern und reguliert die Zugänglichkeit des Chromatins sowie die Rekrutierung der RNA-Polymerase II, um epitheliale Differenzierung, Dezidualisierung, Implantation und die Entwicklung der Milchdrüse zu koordinieren. Die PGR-Signalübertragung ist mit Östrogenrezeptor-Signalwegen, MAPK/PI3K-Kaskaden und Koregulator-Komplexen vernetzt und stimmt so Zellzyklusprogression, Immunmodulation und Gewebeumbau fein ab. Eine fehlregulierte Pgr-Aktivität oder ein verändertes Gleichgewicht der Rezeptor-Isoformen wird häufig genutzt, um reproduktionsendokrinologische Phänotypen und hormonabhängige Veränderungen zu modellieren, die für die Uterusbiologie und die Physiologie der Milchdrüse relevant sind.
Das Progesterone Receptor CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Pgr-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Pgr-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Pgr nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Progesterone Receptor-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Pgr-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Progesterone Receptor-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Pgr-Exone abzielen, die für die Progesterone Receptor-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Pgr-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom Progesterone Receptor CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Progesterone Receptor CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Pgr-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Progesterone Receptor HDR-Plasmid (m) und Progesterone Receptor HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Pgr-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Pgr-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.