PRODH2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-405889-KO-2

Descripción general

PRODH2 codifica una oxidoreductasa mitocondrial dependiente de flavina que participa en el catabolismo de la prolina y la hidroxiprolina, conectando el recambio de aminoácidos con el equilibrio redox celular y el metabolismo energético. Al acoplar reacciones de transferencia de electrones a la cadena respiratoria, la actividad de PRODH2 puede influir en la homeostasis de las especies reactivas de oxígeno y en la adaptación metabólica bajo estrés. La desregulación del metabolismo de la prolina se ha asociado con una función mitocondrial alterada y con cambios en la señalización redox observados en una variedad de fenotipos del neurodesarrollo y metabólicos. En consecuencia, PRODH2 se estudia en vías que conectan el metabolismo mitocondrial, la utilización de aminoácidos y las respuestas al estrés oxidativo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PRODH2 (h2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PRODH2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PRODH2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PRODH2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PRODH2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PRODH2 para la investigación de la señalización de PRODH2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PRODH2 críticos para la función de PRODH2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PRODH2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PRODH2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PRODH2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PRODH2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PRODH2 (h) y el plásmido HDR PRODH2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PRODH2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PRODH2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.