PRMT7 Lentiviral Activation Particles (h): sc-417516-LAC

PRMT7 kodiert die Protein-Arginin-Methyltransferase 7, eine überwiegend dem Typ III zugeordnete PRMT, die die symmetrische Dimethylierung von Argininresten an Histon- und Nicht-Histon-Substraten katalysiert. Über diese epigenetische und posttranslationale Regulation beeinflusst PRMT7 die Chromatinorganisation, die Transkriptionskontrolle sowie RNA-assoziierte Prozesse, die die zelluläre Differenzierung und Stressantworten prägen. Die PRMT7-Aktivität überschneidet sich mit der DNA-Schadenssignalgebung sowie mit metabolischen und inflammatorischen Genprogrammen, indem sie Protein-Protein-Interaktionen und die Zugänglichkeit von Transkriptionsfaktoren moduliert. Eine dysregulierte PRMT7-Expression oder -Signalgebung wurde mit einer veränderten Proliferationsfähigkeit und Linienfestlegung bei Krebs und anderen Erkrankungen in Verbindung gebracht, bei denen epigenetisches Remodeling zur Pathophysiologie beiträgt.

PRMT7 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente PRMT7-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

PRMT7 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der PRMT7-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen PRMT7-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen PRMT7-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.