PRMT2 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-405107-ACT

PRMT2（protein arginine methyltransferase 2）は、ヒトのSAM依存性酵素であり、ヒストンおよび非ヒストン基質のアルギニン残基のメチル化を触媒することで、クロマチンのアクセス性と転写出力を制御します。タンパク質間相互作用やエピジェネティックなシグナル伝達を調節することを通じて、PRMT2は転写調節、RNAプロセシング、細胞周期制御などの過程に影響を及ぼします。PRMT2の活性は核内受容体や炎症性の転写プログラムとも交差しており、その制御が細胞分化やストレス応答を司る経路と結び付いています。PRMT2の発現変化やメチル化依存的シグナルの異常は、複数の疾患関連状況で観察される遺伝子発現の破綻状態と関連づけられており、機序解明や経路に焦点を当てた研究における解析対象として支持されています。

PRMT2 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性PRMT2の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

PRMT2 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における PRMT2 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はPRMT2転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性PRMT2の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のPRMT2遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるPRMT2依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびPRMT2発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるPRMT2経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。