Plasmide Double Nickase (h) PRK2: sc-407649-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PRK2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PRK2 Double Nickase (h) et le plasmide PRK2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PKN2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PRK2 Antibody (A-3): sc-271971
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PRK2 | sc-407649-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PRK2 | sc-407649-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PKN2 code pour la protéine kinase N2 (PRK2), une kinase sérine/thréonine qui agit comme effecteur des GTPases de la famille Rho afin de coordonner le remodelage du cytosquelette, la contractilité actine–myosine et la dynamique d’adhérence cellulaire. PRK2 contribue à des modules de signalisation qui recoupent l’organisation des adhésions focales et des fibres de stress, influençant les changements de forme cellulaire, la migration et la cytocinèse. En régulant des événements de phosphorylation au sein de ces voies, une activité ou une expression altérée de PRK2 est étudiée dans des contextes de motilité aberrante, de phénotypes invasifs et de dérégulation des signaux de croissance pertinents pour la biologie du cancer et la biologie vasculaire. PRK2 est également étudiée pour ses rôles dans les réponses au stress cellulaire et les interactions entre réseaux de kinases qui façonnent les programmes de prolifération et de survie.
PRK2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PKN2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PKN2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PKN2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PKN2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.