Plasmide CRISPR/Cas9 KO PRK2 (m): sc-430934
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- PRK2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique PRK2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PRK2 Antibody (A-3): sc-271971
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO PRK2 (m) | sc-430934 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Chez la souris, Pkn2 code la protéine kinase 2 apparentée à la protéine kinase C (PRK2), une sérine/thréonine kinase de la famille AGC qui agit comme effecteur des GTPases Rho en reliant le remodelage du cytosquelette à la transduction du signal. PRK2 participe à des voies qui régulent la dynamique de l’actine, le renouvellement des adhésions focales, la polarité cellulaire et la signalisation en réponse au stress, avec d’autres rôles rapportés dans le contrôle transcriptionnel et la progression du cycle cellulaire. Par ses interactions avec RhoA et des protéines échafaudages associées, PRK2 peut influencer des programmes de migration et de morphogenèse fréquemment étudiés en biologie du développement et en cancérologie. Une dérégulation de la signalisation associée à PRK2 a été liée à des phénotypes prolifératifs et invasifs modifiés dans des systèmes modèles, ce qui étaye sa pertinence pour des études mécanistiques d’états cellulaires liés aux maladies.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO PRK2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Pkn2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Pkn2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Pkn2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine PRK2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Pkn2 pour l'étude de la signalisation de PRK2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Pkn2 essentiels à la fonction de PRK2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Pkn2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le PRK2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le PRK2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Pkn2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le PRK2 plasmide HDR (m) et le PRK2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Pkn2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Pkn2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.