PRIC285 Plasmide Double Nickase (h): sc-406441-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PRIC285 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PRIC285 Double Nickase Plasmid (h) e il PRIC285 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HELZ2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PRIC285 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406441-NIC | 20 µg | $410.00 |
HELZ2 (riportato anche come PRIC285) codifica un co-regolatore trascrizionale di tipo elicasi, implicato nell’accoppiamento della segnalazione dei recettori nucleari ai programmi di espressione genica che controllano la gestione dei lipidi e le risposte infiammatorie. Partecipa al controllo trascrizionale a valle di recettori quali i PPAR e di altri regolatori metabolici correlati, influenzando vie associate all’adipogenesi, alla sensibilità all’insulina e alla segnalazione dell’immunità innata. Un’alterazione dell’attività di HELZ2/PRIC285 è stata associata a una regolazione anomala dell’omeostasi metabolica e a fenotipi infiammatori, a supporto del suo impiego come nodo meccanicistico di collegamento tra metabolismo e regolazione trascrizionale. Queste funzioni rendono HELZ2 un bersaglio rilevante per lo studio delle reti di regolazione genica in epatociti, adipociti e modelli cellulari di derivazione immunitaria.
PRIC285 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HELZ2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HELZ2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HELZ2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HELZ2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.