PRIC285 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406441

Übersicht

HELZ2 kodiert PRIC285, einen mutmaßlichen helicaseähnlichen Faktor, der über die Koaktivierung von nukleären Rezeptoren und den chromatinassoziierten RNA‑Stoffwechsel an der Transkriptionsregulation beteiligt ist. PRIC285 wurde mit metabolischen Genprogrammen in Verbindung gebracht, die durch PPAR und verwandte Signalwege gesteuert werden, wodurch es mit der Lipidhomöostase, der mitochondrialen Funktion und der Entzündungssignalgebung verknüpft ist. Eine veränderte HELZ2‑Aktivität wurde in Zusammenhängen metabolischer Dysregulation und tumorassoziierter transkriptioneller Umprogrammierung beschrieben, was es für Studien zu genregulatorischen Netzwerken und Zellzustandsübergängen relevant macht. Seine nukleären Funktionen machen HELZ2 zu einem nützlichen Knotenpunkt, um das Zusammenspiel (Crosstalk) zwischen Transkription, RNA‑Prozessierung und stressresponsiven Programmen in menschlichen Zellen zu untersuchen.

Das PRIC285 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des HELZ2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des HELZ2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von HELZ2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die PRIC285-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von HELZ2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der PRIC285-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf HELZ2-Exone abzielen, die für die PRIC285-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere HELZ2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom PRIC285 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom PRIC285 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des HELZ2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das PRIC285 HDR-Plasmid (h) und PRIC285 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von HELZ2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten HELZ2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.