Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
PP2A-Cβ CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-400937
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- PP2A-Cβ Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im PP2A-Cβ-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: PP2A-Cα/β: sc-80665
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
PP2A-Cβ CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) | sc-400937 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
PPP2CB kodiert die katalytische Beta-Untereinheit der Proteinphosphatase 2A (PP2A-Cβ), einer wichtigen Serin/Threonin-Phosphatase, die mit unterschiedlichen regulatorischen B‑Untereinheiten heterotrimere PP2A-Holoenzyme bildet, um Substratspezifität und subzelluläre Lokalisation zu steuern. PP2A-Cβ wirkt der Kinase-Signalgebung entgegen, indem es zentrale Knotenpunkte in Signalwegen dephosphoryliert, die den Zellzyklus, DNA-Schadensantworten und Stresssignalwege regulieren, darunter AKT/MAPK sowie mehrere mitotische Regulatoren. Über diese Aktivitäten trägt PP2A zur Aufrechterhaltung der Phosphorylierungs-Homöostase bei, die Transkriptionsprogramme, Zytoskelettdynamik und metabolische Kontrolle beeinflusst. Eine fehlregulierte PP2A-Signalgebung sowie veränderte Expression oder Regulation von PPP2CB wurden mit aberranter Proliferations- und Überlebenssignalgebung in Verbindung gebracht, was für Onkologie und neurobiologisch ausgerichtete Studien zu phosphataseabhängigen Signalnetzwerken relevant ist.
Das PP2A-Cβ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des PPP2CB-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des PPP2CB-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von PPP2CB nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die PP2A-Cβ-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von PPP2CB-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der PP2A-Cβ-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf PPP2CB-Exone abzielen, die für die PP2A-Cβ-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere PPP2CB-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom PP2A-Cβ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom PP2A-Cβ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des PPP2CB-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das PP2A-Cβ HDR-Plasmid (h) und PP2A-Cβ HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von PPP2CB-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten PPP2CB-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.