Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PP1γ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-422379-KO-2
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PP1γ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PP1γ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PP1γ Anticorpo (E-4): sc-515943
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PP1γ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) | sc-422379-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ppp1cc codifica a fosfatase de proteína 1 gama (PP1γ) do camundongo, uma fosfatase catalítica de serina/treonina que controla a sinalização dependente de fosforilação ao desfosforilar diversos substratos no núcleo e no citoplasma. A PP1γ atua no contexto de holoenzimas multiproteicas que direcionam a especificidade para processos como progressão do ciclo celular, dinâmica da cromatina, processamento de RNA e remodelamento do citoesqueleto. Por meio dessas vias, a PP1γ contribui para a regulação da saída da mitose, das respostas a danos no DNA e de programas de diferenciação celular. A desregulação da sinalização da família PP1 e a alteração da homeostase de fosforilação estão associadas a mecanismos relevantes para distúrbios proliferativos, instabilidade genômica e neurobiologia, o que sustenta seu uso em estudos funcionais focados em vias.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PP1γ (m2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ppp1cc em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ppp1cc, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ppp1cc na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PP1γ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ppp1cc para a investigação da sinalização de PP1γ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ppp1cc críticos para a função PP1γ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ppp1cc para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PP1γ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PP1γ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ppp1cc. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PP1γ Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PP1γ (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ppp1cc para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ppp1cc definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.