非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
ACTH/CLIP 抗体 (F-3): sc-373878. 大鼠垂体组织提取物 (A) 和 AtT-20/D16vF2 全细胞裂解液 (B) 中 ACTH/CLIP 表达的近红外 Western 印迹分析. 用 UltraCruz® 阻断试剂: sc-516214 阻断. 所用检测试剂: m-IgGκ BP-CFL 790: sc-516181.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
POMC CRISPR/Cas9 KO质粒 (r): sc-437377
- 针对种属：rat
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- POMC CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（r） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在POMC基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：ACTH/CLIP: sc-373878，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
POMC CRISPR/Cas9 KO质粒 (r) | sc-437377 | 20 µg | $397.00 |
概述
促黑素原（Proopiomelanocortin，POMC）是一种神经内分泌前激素前体，可经蛋白水解加工生成多种具有生物活性的肽段，包括 ACTH 和黑皮质素类肽，它们共同协调应激轴信号传导、能量平衡、色素沉着以及痛觉感知。在大鼠的下丘脑与垂体通路中，POMC 来源的肽通过黑皮质素受体发挥作用，并整合营养与激素信号线索，从而调控摄食行为和代谢稳态。POMC 的表达受到发育阶段以及对刺激有反应的转录程序的严格控制；而 POMC 的加工或信号传导发生异常与肥胖相关表型、HPA 轴反应失调以及内分泌功能障碍有关。作为神经肽生物合成与 GPCR 介导信号传导的关键枢纽，POMC 被广泛用于研究神经内分泌细胞身份、肽成熟过程以及全身生理功能。
POMC CRISPR/Cas9 KO质粒（r）是一组旨在针对性地破坏rat细胞系中基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使POMC蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建缺失的细胞模型，用于POMC信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 POMC 功能至关重要的 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 POMC CRISPR/Cas9 KO 质粒 (r) 和 POMC CRISPR/Cas9 KO 质粒 (r2) 编码的 gRNA 分别靶向 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 POMC HDR 质粒（r）编码的 HDR 供体构建体以及 POMC HDR质粒（r2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。