POMC CRISPR/Cas9 KO Plasmid (r): sc-437377

Übersicht

Proopiomelanocortin (POMC) ist ein neuroendokriner Prohormon‑Vorläufer, der proteolytisch zu mehreren bioaktiven Peptiden verarbeitet wird, darunter ACTH und Melanocortine, die gemeinsam die Signalübertragung der Stressachse, die Energiebilanz, die Pigmentierung und die Nozizeption koordinieren. In hypothalamischen und hypophysären Signalwegen der Ratte wirken POMC‑abgeleitete Peptide über Melanocortinrezeptoren und integrieren Nährstoff‑ und Hormonsignale, um Fressverhalten und metabolische Homöostase zu regulieren. Die POMC‑Expression wird durch entwicklungsabhängige und reizresponsive Transkriptionsprogramme streng kontrolliert; eine veränderte POMC‑Prozessierung oder Signalgebung wird mit Adipositas‑assoziierten Phänotypen, dysregulierten HPA‑Achsen‑Antworten und endokrinen Funktionsstörungen in Verbindung gebracht. Als zentraler Knotenpunkt der Neuropeptid‑Biosynthese und der GPCR‑vermittelten Signalübertragung wird POMC häufig genutzt, um neuroendokrine Zellidentität, Peptidreifung und systemische Physiologie zu untersuchen.

Das POMC CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (r) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des -Gens in rat-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des -Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die POMC-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von -defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der POMC-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf -Exone abzielen, die für die POMC-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere -Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom POMC CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (r) und vom POMC CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (r2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des -Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das POMC HDR-Plasmid (r) und POMC HDR-Plasmid (r2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von -Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten -Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.