非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
ACTH 抗体 (B427): sc-57021. 非转染: sc-117752 (A) 和人 POMC 转染: sc-111490 (B) 293T 全细胞裂解液中 POMC 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
POMC CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-400592
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- POMC CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在POMC基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：ACTH/CLIP: sc-373878，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
POMC CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-400592 | 20 µg | $397.00 |
概述
POMC（促黑素原，proopiomelanocortin）编码一种分泌型前激素，可经蛋白水解加工生成多种具有生物活性的肽段，包括 ACTH（促肾上腺皮质激素）和黑素细胞刺激素等，这些肽共同协调内分泌应激信号、能量稳态、色素沉着以及痛觉调控。在垂体促皮质激素细胞中，POMC 来源的 ACTH 通过黑皮质素受体相关通路驱动肾上腺类固醇生成，将下丘脑–垂体–肾上腺（HPA）轴活性与全身代谢和免疫反应联系起来。POMC 的加工依赖受调控的分泌通路运输以及前激素转化酶，并与 cAMP/PKA 信号及神经内分泌分化程序整合。POMC 功能失调或缺失与肾上腺功能异常、肥胖与暴食表型，以及与神经内分泌和代谢研究相关的黑皮质素信号改变有关。
POMC CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中POMC基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对POMC基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏POMC开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使POMC蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建POMC缺失的细胞模型，用于POMC信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 POMC 功能至关重要的 POMC 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 POMC 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 POMC CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 POMC CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 POMC 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 POMC HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 POMC HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由POMC同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定POMC靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。