POLDIP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-413603

概要

POLDIP3（polymerase delta interacting protein 3、DNAポリメラーゼδ相互作用タンパク質3。SKARとしても知られる）は、mRNAスプライシングと翻訳を連結し、細胞増殖に必要なタンパク質の効率的な合成を支えるRNA結合タンパク質です。mTORシグナル伝達の下流で機能し、リン酸化依存的な相互作用によって翻訳開始や、スプライシングされた転写産物へのリボソーム動員の協調を助けます。さらにPOLDIP3は、DNAポリメラーゼ複合体との相互作用を介してゲノム維持経路の制御にも関与するとされ、増殖シグナルと複製に伴うプロセスを統合します。これらのRNAプロセシングおよび増殖制御ネットワークの破綻は、悪性形質転換、細胞ストレス応答、ならびに増殖性疾患の研究において重要です。

POLDIP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPOLDIP3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、POLDIP3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、POLDIP3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、POLDIP3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、POLDIP3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、POLDIP3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• POLDIP3の機能に不可欠なPOLDIP3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、POLDIP3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• POLDIP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPOLDIP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、POLDIP3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  POLDIP3 HDRプラスミド（h）および POLDIP3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPOLDIP3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPOLDIP3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。