Plasmide Double Nickase (h) plexin-C1: sc-403944-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) plexin-C1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide plexin-C1 Double Nickase (h) et le plasmide plexin-C1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PLXNC1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: plexin-C1 Antibody (B-8): sc-390216
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) plexin-C1 | sc-403944-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) plexin-C1 | sc-403944-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PLXNC1 code la plexine‑C1, un récepteur transmembranaire à passage unique des sémaphorines de classe 7, qui convertit des signaux de guidage en remodelage du cytosquelette. La signalisation de la plexine‑C1 s’interface avec de petites GTPases pour réguler l’adhérence cellulaire, la migration et la motilité directionnelle, influençant des processus tels que le trafic des cellules immunitaires et la mise en place des tissus. En biologie humaine, une expression altérée de la plexine‑C1 ou un déséquilibre de sa voie de signalisation a été associé à des modifications du comportement invasif et du potentiel métastatique dans plusieurs contextes cancéreux, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques de la plasticité des cellules tumorales. Le rôle du récepteur dans l’inhibition de contact dépendante des sémaphorines et dans la signalisation du microenvironnement soutient également l’étude de la manière dont les signaux extracellulaires façonnent les programmes de navigation cellulaire.
plexin-C1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PLXNC1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PLXNC1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PLXNC1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PLXNC1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.